Directrices para el tratamiento de las leishmaniasis en la región de las américas - 2 ed / Guidelines for the treatment of leishmaniasis in the region of the Americas - 2 ed

Las leishmaniasis son enfermedades infecciosas desatendidas de gran importancia en la Región de las Américas debido a su morbilidad, mortalidad y amplia distribución geográfica. De las tres formas clínicas principales, la cutánea es la más común y la visceral es la forma más grave, ya que puede causar la muerte de hasta 90% de las personas que no reciban tratamiento. En el 2013, la Organización Panamericana de la Salud (OPS) elaboró recomendaciones para el tratamiento de las leishmaniasis en la Región de las Américas utilizando la metodología de clasificación de la valoración, la elaboración y la evaluación de las recomendaciones (GRADE, por su sigla en inglés). No obstante, dada la evidencia acumulada desde entonces, se hizo necesario revisar esas recomendaciones. En esta segunda edición se presentan las recomendaciones actualizadas sobre el tratamiento de las leishmaniasis, y se detallan los esquemas y los criterios de indicación del tratamiento en el contexto regional. Estas directrices presentan modificaciones sustanciales con respecto a la primera edición. En el caso de la leishmaniasis cutánea, se ha eliminado el ketoconazol de las opciones terapéuticas, el número de especies de Leishmania para las que hay evidencia sólida de la eficacia de la miltefosina ha aumentado de dos a cuatro y la recomendación de administrar antimoniales intralesionales ahora es fuerte. Con respecto a la leishmaniasis mucosa, se incluye una recomendación fuerte sobre el uso de antimoniales pentavalentes con o sin pentoxifilina oral. Por lo que respecta a la leishmaniasis visceral, la recomendación fuerte sobre el uso de antimoniales pentavalentes y desoxicolato de anfotericina B ahora es condicional. También hay evidencia contundente en contra del uso de miltefosina en pacientes con leishmaniasis causada por Leishmania infantum. Otros cambios importantes son el desglose de las recomendaciones según si se trata de pacientes adultos o pediátricos, la inclusión de las especies de Leishmania y, en el caso de los pacientes inmunocomprometidos, la introducción de una recomendación fuerte contra el uso de antimoniales pentavalentes. Esta segunda edición es una versión revisada de la publicación Leishmaniasis en las Américas: recomendaciones para el tratamiento: https://iris.paho.org/handle/10665.2/7704

Estrategias digitales de educación en salud sobre leishmaniasis / Digital strategies for health education on leishmaniasis

La leishmaniasis es una enfermedad desatendida y endémica en localidades remotas de Perú, y existe evidencia de un alto índice de inexperiencia por parte del personal de salud que labora en zonas endémicas; asociada al diagnóstico, tratamiento y desconocimiento de protocolos nacionales e internacionales respecto a la enfermedad; lo que se traduce en un incremento de eventos adversos o una cura incompleta para los pacientes. Por otro lado, la pandemia por COVID-19, ha originado interrupción en los sistemas educativos, estimulando la aplicación de enfoques educativos a distancia. Se elaboró un programa académico de educación superior bajo la modalidad virtual, dirigido a profesionales sanitarios que laboran en áreas de riesgo o endémicas de leishmania, en el marco del eLearning, empleando tecnologías de información y comunicación (TIC) como herramientas para el aprendizaje; y se aplicó la metodología MEDESME en la planificación de herramientas digitales educativas. El producto incluyó la ficha académica del programa "leishmaniasis tegumentaria y visceral", diversos recursos de autoaprendizaje y estrategias de evaluación digitales. La aplicación del programa educativo permitiría capacitar y actualizar conocimientos a los profesionales de la salud y, en consecuencia, optimizar el diagnóstico, tratamiento y seguimiento de los pacientes afectados por las distintas manifestaciones de la leishmaniasis(AU)

Leishmaniasis is a neglected and endemic disease in remote locations in Peru, and there is evidence of a high rate of inexperience on the part of health personnel working in endemic areas; associated with the diagnosis, treatment and ignorance of national and international protocols regarding the disease; which translates into an increase in adverse events or an incomplete cure for patients. On the other hand, the COVID-19 pandemic has caused disruption in educational systems, stimulating the application of distance educational approaches. An academic program of higher education was developed under the virtual modality, aimed at health professionals who work in risky or endemic areas of leishmania, within the framework of eLearning, using information and communication technologies (ICT) as tools for learning; and the MEDESME methodology was applied in the planning of educational digital tools. The product included the academic record of the program "integumentary and visceral leishmaniasis", various self-study resources and digital assessment strategies. The application of the educational program would allow health professionals to be trained and updated and, consequently, to optimize the diagnosis, treatment and follow-up of patients affected by the different manifestations of leishmaniasis(AU)

Environmental risk factors of leishmaniasis in Bahia State, Brazil using NASA Earth observation satellites / Fatores de risco ambientais para leishmanioses no estado da Bahia, Brasil, utilizando satélites da NASA de observação da Terra

NASA’s Earth Observing Satellites (EOS) were used to calculate three vegetation indices, extract precipitation and elevation data, and then evaluate their applicability for assessing risk of visceral leishmaniasis (VL) and cutaneous leishmaniasis (CL) in Bahia State, Brazil. Regression models showed that either form of leishmaniasis can be predicted by NDVI, NDMI, NDWI data products and TRMM) precipitation data (R2 = 0.370; p<0.001). Elevation was not significantly associated with the distribution of either VL or CL. In areas of high annual precipitation, CL was 3.6 times more likely to occur than VL. For vegetative moisture (NDMI), CL was 2.11 times more likely to occur than VL. Odds of CL occurrence increased to 5.5 times when vegetation (NDVI) and 13.5 times when liquid water content of vegetation canopies (NDWI) was considered. Areas at risk of CL and VL were mapped based on the selected explanatory variables. Accuracy of models were assessed using area under the receiver operating characteristic curve (AUC=0.72). We propose that statewide scale risk models based on use of EOS products will be a useful tool at 1 km2 spatial resolution to enable health workers to identify and target high risk areas to prevent transmission of leishmaniasis.

Os satélites de observação da Terra (SOT) da NASA foram usados para calcular três índices de vegetação, extrair dados de precipitação e elevação e avaliar sua aplicabilidade para identificar o risco para leishmaniose visceral (LV) e leishmaniose tegumentar (LT) no Estado da Bahia, Brasil. Modelos de regressão mostraram que ambas as formas de leishmaniose podem ser preditas pelos NDVI, NDMI, NDWI e precipitação TRMM (R2 = 0,370; p<0,001). A elevação não foi significativamente associada à distribuição de LV ou LT. Em áreas de alta precipitação anual, a LT foi 3,6 vezes mais provável de ocorrer do que a LV. Para a umidade vegetativa (NDMI), a LT apresentou 2,11 maior probabilidade de ocorrer do que a LV. As chances de ocorrência de LT aumentaram para 5,5 vezes em relação com a vegetação (NDVI) e 13,5 vezes quando o conteúdo de água líquida dos dosséis da vegetação (NDWI) foi considerado. Áreas em risco de LT e LV foram mapeadas com base nas variáveis explicativas selecionadas. A precisão dos modelos foi avaliada usando a área sob curva característica de operação do receptor (Curva COR=0,72). Propusemos que os modelos de risco em escala estadual baseados no uso de produtos SOT são uma ferramenta útil na resolução espacial de 1 km2 por permitir que profissionais de saúde identifiquem e direcionem áreas de alto risco para evitar a transmissão da leishmaniose.

Contribuciones de la epidemiología al control de la leishmaniosis / Contributions of epidemiology to the control of leishmaniasis

RESUMEN La leishmaniosis continúa siendo un importante problema de salud pública pese a los esfuerzos gubernamentales, de grupos e individuos. Se estima que a nivel mundial se producen entre 50 000 y 90 000 casos nuevos de leishmaniosis visceral y entre 0.5 y 1 millón de leishmaniosis tegumentaria. Además, en algunas regiones esta parasitosis tiene carácter endemoepidémico, y en los últimos años ha incrementado su frecuencia y distribución. El objeto del presente escrito es mostrar algunas contribuciones de la epidemiología al control de la leishmaniosis, como resultado de la descripción y del análisis de la distribución y de los determinantes de esta parasitosis, extremadamente compleja en cuanto a transmisor, agente etiológico, reservorio y susceptible. Con base en la revisión de la literatura científica en el contexto de un estudio descriptivo, documental y retrospectivo se alcanzó el objetivo del presente escrito. Se concluye que es clara la utilidad de la epidemiología en el control de la leishmaniosis o, en todo caso, se reafirma el carácter válido y práctico de la epidemiología en el quehacer programático y operativo de la intervención en salud en el caso de la leishmaniosis.(AU)

ABSTRACT Leishmaniasis despite government efforts, groups and individuals continues to be a major public health problem, it is estimated that globally occur between 50 000 and 90 000 new cases of visceral leishmaniasis and between 0.5 and 1 million tegumentary leishmaniasis, plus in some regions, this parasitism has an endemo-epidemic nature, and in recent years its frequency and distribution have increased. The purpose of this paper is to show some contributions of epidemiology to the control of leishmaniasis, as a result of the description and analysis of the distribution and determinants of this parasitism, extremely complex in terms of transmitter, etiological agent, reservoir and susceptible. Based on the review of the scientific literature in the context of a descriptive, documentary and retrospective study, the objective of this paper was achieved. It is concluded that the usefulness of epidemiology in the control of leishmaniasis is clear or in any case reaffirms the validity and practicality of epidemiology in the programmatic and operational task of health intervention in the case of leishmaniasis.(AU)

Protocolo del Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica: enfermedades vectoriales de origen parasitario. No. 04 / Protocol of the National Epidemiological Surveillance System: vector diseases of parasitic origin. No. 04

Estos protocolos están dirigido a personal médico, paramédico y otros profesionales que realizan acciones gerenciales y operativas de vigilancia epidemiológica en los servicios de salud del país, y están divididos en varios tomos para dar a conocer y actualizar la identificación y medidas de control para diversos padecimientos a fin de continuar con el mejoramiento de las capacidades técnicas de los trabajadores de salud, que permita planificar la prestación de servicios con decisiones partiendo de un enfoque epidemiológico comprobado, para responder a los cambios de tendencias epidemiológicas y con ello contribuir al fortalecimiento de prácticas asertivas de la salud pública de nuestro país.

La leishmaniosis cutánea en Costa Rica: prevención, diagnóstico y tratamiento / Cutaneous leishmaniasis in Costa Rica: prevention, diagnosis and treatment

Resumen El objetivo de esta investigación fue describir el estado actual de la leishmaniosis en Costa Rica, profundizar en las diferentes manifestaciones clínicas y en las especies identificadas a la fecha causantes de la enfermedad, para recomendar tratamientos de acuerdo con estas, así como describir su comportamiento epidemiológico con el propósito de recomendar estrategias de prevención y control en los grupos identificados. Como fuentes de información se utilizaron la base de datos del Registro Colectivo del Ministerio de Salud de Costa Rica, de 2011 a 2016 y las estimaciones de población del Instituto Nacional de Estadísticas y Censos. La incidencia promedio de leishmaniosis en el trienio 2005-07 fue de 35,5 casos por 100 000 y pasó a 30,5 en el trienio 2014-16. Los grupos más afectados fueron los menores de 15 años con: 44,42 casos por cien mil. En San Ramón, Guatuso, Turrialba y Talamanca las tasas de incidencia superan la tasa de incidencia promedio.

Abstract The purpose of the present research was to describe the different species of Leishmania sp. in Costa Rica so as to recommend specific treatment; also, we wish to describe the epidemiological behavior of the different species in order to suggest prevention and control strategies. Our sources were Collective Registry Data of the Ministry of Health estimates (2011 to 2016) and population data from the National Institute of Statistics and the Census. The average incidence rate from 2005 through 2007 was 35.5 cases per 100,000; the rate went down to 30.5 during the years 2011 through 2016. The most affected age group were those younger than 15 years with a rate of 44.42 per 100,000. Since 2005, the areas in which incidence rates are higher than the average national incidence rate are: San Ramón, Guatuso, Turrialba and Talamanca. Management must be carried out according to: the identified species of the parasite and also according to the experience of experts in Costa Rica. Prevention must be directed to the identified risk groups.

Antichagásicos e leishmanicidas potenciais: estudo das condições de síntese de pró-fármacos dendriméricos de 3-hidroxiflavona / Potential antichagasic and leishmanicide compounds: study of synthesis conditions of 3-hydroxyflavone dendrimer prodrugs

INTRODUÇÃO: A doença de Chagas e a leishmaniose são doenças tropicais supernegligenciadas, que afetam regiões de extrema pobreza. Os fármacos disponíveis para estas duas doenças são escassos, de eficácia limitada, de alta toxicidade e suscitam casos de resistência. OBJETIVO: Considerando-se a necessidade de desenvolvimento de novos agentes antichagásicos e leishmanicidas, a importância da latenciação no aprimoramento de fármacos/compostos bioativos e a versatilidade de transportadores dendriméricos, o objetivo deste trabalho foi a síntese de pró-fármacos dendriméricos de primeira geração de 3-hidroxiflavona, composto que apresenta potencial atividade tripanomicida e leishmanicida. Desta forma, pretendeu-se obter liberação controlada, melhora da permeabilidade, toxicidade reduzida e aumento da eficácia deste agente bioativo. MATERIAL E MÉTODOS: Para a obtenção desses dendrímeros empregaram-se as abordagens divergente e convergente, compostas por várias etapas de síntese com reações de proteção, desproteção e acoplamentos. RESULTADOS E DISCUSSÃO: A abordagem convergente apresentou problemas sintéticos, devido à instabilidade dos derivados contendo 3-hidroxiflavona nas diferentes condições reacionais e de purificação testadas. No entanto, há indícios da síntese dos pró-fármacos dendriméricos de 3-hidroxiflavona, mas esses compostos apresentam-se impuros. Devido a essa instabilidade e a dificuldade de purificação na abordagem convergente, optou-se pela síntese divergente, no qual o composto bioativo é acoplado na etapa final. Os estudos sintéticos mostraram a obtenção dos intermediários puros formados pelos focos centrais propano- e hexano-diamina acoplados ao ácido málico protegido. CONCLUSÃO: Há indicativos da obtenção de pró-fármacos dendriméricos de 3-hidroxiflavona, ainda que impuros. As maiores dificuldades encontradas foram a purificação e a estabilidade dos compostos obtidos

INTRODUCTION: Chagas' disease and leishmaniasis are super neglected tropical diseases that affect primarily areas of extreme poverty. The drugs available for these diseases are scarce and of limited effectiveness, toxic and rouse resistance. OBJECTIVE: Considering that the development of new antichagasic and leishmanicide agents are urgently needed, the importance of prodrug design to the improvement of drugs and bioactive compounds and the versatility of dendrimers as drug carriers, the objective of this work was the synthesis of dendrimer prodrug of 3-hydroxyflavone, which shows potential antichagasic and leishmanicide activities. Thus, we intended to obtain controlled release, improvement of the permeability, reduction of the toxicity and increase of efficacy of this bioactive agent. MATERIAL AND METHODS: Convergent and divergent approaches have been used to synthesize those compounds. Synthetic steps consist of protection, deprotection and coupling reactions. RESULTS AND DISCUSSION: The convergent approach presented problems due to the instability of the 3-hydroxyflavone derivatives, in different reaction and purification conditions. However, there is evidence of the synthesis of dendrimer prodrugs, though still impure. Due to instability and purification difficulty of intermediate, we performed the divergent synthesis. We obtained the pure intermediates composed by cores propanediamine and hexanediamine coupled to the protected malic acid as spacer group. CONCLUSION: Synthetic studies suggested the synthesis of dendrimer prodrugs, although impure. The greatest difficulties were the purification and the instability of compounds

Perfil de transcrição gênica de células humanas estimuladas com a saliva de Lu. intermedia ou de Lu / Gene transcription profile of human cells stimulated with Lu saliva. Intermedia or Lu

A saliva dos flebotomíneos transmissores do parasita Leishmania possui uma variedade de agentes farmacológicos, como anticoagulantes, vasodilatadores além de moléculas imunomoduladoras e anti-inflamatórias. A saliva de Lu. intermedia e de Lu. longipalpis provocam o aumentam da infecção por diferentes espécies de Leishmania, em modelos experimentais.Entretanto a pré-exposição à saliva de Lu. longipalpis confere proteção a infecção, enquanto a pré-exposição à saliva de Lu. intermedia causa exacerbação da doença. Neste trabalho estimulamos as células do sangue de voluntários sadios com a saliva de Lu. intermedia ou de Lu. longipalpis e, posteriormente, o RNA foi extraído e utilizado no sequenciamento em larga escala (RNAseq). O estudo demonstrou que a saliva de Lu. intermedia e de Lu.longipalpismodula a expressão de uma série de genes e os processos biológicos mais requentes são semelhantes após a estimulação com as duas diferentes salivas. Identificamos seis processos biológicos comuns às salivas dos dois lebotomineos:Taxis,Chemotaxis,Locomotory behavior, Positive regulation of immune system process, Regulation of cytokine production e Regulation of cell activation. Dentre os genes que caracterizam esses seis processos,detectamosgenes que codificam quimiocinas, citocinas além de moléculas de superfície tais como CCL19, CCL2, CCL3, CCL4, CD80, CD83, IL10, IL1B, IL4, IL6.Definimos um conjunto de genes encontrados exclusivamente na amostra estimulada com a saliva de Lu. intermedia (ADA, CCL23, CCL3, CCL3L1, CXCL11, PDGFB, PDPN, PLAU e TNFSF15). Da mesma forma, encontramos um outro conjunto de genes expresso exclusivamenteem células estimuladas com a saliva de Lu. longipalpis(ENPP2, EREG, IDO1,IL1A e VEGFA). Essas diferenças podem fornecer pistas para o desenvolvimento da leishmaniose em indivíduos continuamente expostos à saliva de Lu. intermedia.

The saliva of sand flies, vectors of leishmania parasite, has a variety of pharmacological agents, such as anticoagulants, vasodilators as well as immunomodulatory and antiinflammatory molecules. Lu. intermedia and Lu. longipalpis increase the infection by different species of leishmania in experimental models. However, the pre-exposure to Lu. longipalpis saliva provides protection to infection, while the pre-exposure Lu. intermedia saliva causes exacerbation of the disease. In this work, we stimulated peripheral blood cells from healthy volunteers with salivary glands from Lu. intermedia or Lu. longipalpis and later RNA was extracted and used in large-scale sequencing (RNAseq). This study demonstrated that Lu. intermedia and Lu. longipalpis saliva modulate the expression of a number of genes and the most frequent biological processes are similar in cells stimulated with both saliva. We identified six biological processes commonly upregulated following stimulation with saliva of the two sand flies: taxis, chemotaxis, locomotory behavior, positive regulation of immune system process, regulation of cytokine production and regulation of cell activation. Among the genes that characterize these six biological processes, we detected genes encoding chemokines, cytokines plus surface molecules such as:CCL19, CCL2, CCL3, CCL4, CD80, CD83, IL10, IL1B, IL4 and IL6. We found a set of genes upregulated exclusively in cells stimulated with Lu. intermedia saliva (ADA, CCL23, CCL3, CCL3L1, CXCL11, PDGFB, PDPN, PLAU and TNFSF15). Similarly, another set of genes was expressed only in cells stimulated Lu. longipalpis saliva (ENPP2, EREG, IDO1,IL1A and VEGFA). These differences may provide clues for the development of leishmaniasis in individuals continuously exposed to Lu. intermedia saliva.

Eco-epidemiologia das leishmanioses em Jaboticatubas, Serra do Cipó, um importante pólo turístico de Minas Gerais

A proposta deste estudo foi avaliar a transmissão das leishmanioses no município de Jaboticatubas, Serra do Cipó, região turística de Minas Gerais.Para tal, foram realizados estudos entomológicos e de reservatórios urbanos da doença. Para os estudos entomológicos foram selecionados oito bairros,levando-se em consideração a ocorrência de casos humanos, e colocadas armadilhas luminosas do tipo HP, no peridomicílio de 10 residências, durante três noites consecutivas por mês, entre maio de 2012 a abril de 2013. A fauna flebotomínica estudada foi composta de 3.104 exemplares, sendo bastante diversificada com 17 espécies do gênero Lutzomyia e duas fêmeas do gênero Brumptomyia. Com relação às espécies de importância médica e também numerosas, ressaltamos o encontro de Lu. whitmani (33,80%), Lu. intermedia(14,60%) e Lu. longipalpis (7,96%). A taxa de infecção natural geral dos flebotomíneos por Leishmania foi de 3,40%. Foram analisados 249 “pools” de diferentes espécies de flebotomíneos, dentre estes 32 estavam positivos. Para o estudo da taxa de infecção canina, realizou-se inquérito censitário em cães domiciliados em área urbana do município. Foram coletadas 1.105 amostras de soros que foram testadas por meio do DPP® e as positivas confirmadas as infecções através do Ensaio Imunoenzimático ELISA, obtendo-se a taxa média de prevalência canina de 7,78%.

Dos 86 cães positivos, foi escolhida uma amostra aleatória de 11 deles, que foram necropsiados e com as amostras de biópsia de tecidos obtidas foram realizados “imprints”, cultura de parasitos ePCR. Foi realizado o georreferenciamento na zona urbana de todos os casos caninos e humanos de leishmanioses dos últimos 6 anos, e construído um mapa mostrando a distribuição dos casos. A PCR de aspirado medular apresentou maior positividade (63,60%) em relação à pele (9,00%). Já nos“imprints”, a taxa de positividade da pele foi de 36,36% e de medula 0%.Quanto à cultura de aspirados de medula óssea, a positividade foi de 27,27%.Nossos resultados indicam a urbanização das leishmanioses no município,devido à alta densidade vetorial e infecção por Leishmania, expressiva taxa média de prevalência de infecção canina e recentes registros de casos humanos, Portanto, é importante intensificar as ações de controle a fim de evitar que o problema se agrave no município.

Estudo da associação de micronutrientes ( zinco, cobre e ferro) na infecção, e ou progressão para leishmaniose tegumentar em duas comunidades rurais do Estado da Bahia / Study of micronutrients Association (zinc, copper and iron) in infection and or progression to cutaneous leishmaniasis in two rural communities in the state of Bahia

A leishmaniose tegumentar (LT) é um problema de saúde pública nas Américas, não somente por sua alta incidência e ampla distribuição geográfica, mas também, pela possibilidade de produzir úlceras persistentes e desfigurantes. É endêmica no Brasil, ocorrendo em ambientes florestais e extraflorestais. A detecção de áreas de alto risco para a infecção humana pode auxiliar na implementação de estratégias de controle mais eficientes nas áreas endêmicas rurais. Objetivos: descrever as características epidemiológicas, prevalência da infecção por Leishmania ssp nas populações do povoado de São Gonçalo/Contendas do Sinçorá - Bahia e no Distritode Florestal/Município de Jequié, Bahia, correlacionando os fatores de risco estabelecidos na literatura com os diferentes grupos estudados (indivíduos infectados, não infectados, e doentes) e avaliar a influencia da desnutrição na infecção e ou progressão para a doença, para isso, foram avaliados parâmetros bioquímicos como dosagem de fosfatase alcalina e ferritina, além dos níveis de metais Zn, Cu e Fe no plasma dos indivíduos.Material e Métodos - desenvolveu-se um estudo de corte transversal, através de inquérito epidemiológico, e imunoalérgico (exames intradermorreação de Montenegro/IDRM, e sorológico/ELISA). Foram cadastradas 36 famílias (170 indivíduos) de São Gonçalo e 129 famílias (480 indivíduos) de Florestal...

The cutaneous leishmaniasis (CL) is a public health problem in the Americas, not only for its high incidence and wide geographical distribution, but also by the possibility of establishing persistent and disfiguring ulcers. It is endemic in Brazil, occurring in forest and around environments. The detection of high-risk areas for human infection may assist in implementing strategies for more efficient control in rural endemic areas. Objectives -.This study aimed to describe the epidemiological characteristics, prevalence of Leishmania spp, infection in populations of São Gonçalo a rural communities/Contendas do Sincorá - Bahia and Florestal (District/Jequié, Bahia), correlating risk factors established in the literature with different groups studied (infected individuals not infected, and patients) and assess the influence of malnutrition on infection and progression for disease, for that biochemical parameters will be evaluated as measure alkaline phosphatase and ferritin, beyond the levels of metals Zn, Cu and Fe in the plasma of subjects. Materials and Metholds.- We developed a cross-sectional study through epidemiologic and immunological investigation (Montenegro skin tests/MST, and serological/ELISA). 36 families (170 individuals) of São Gonçalo and 129 families (480 individuals) were registered in Florestal District...

Eco-epidemiologia das leishmanioses em Jaboticatubas, Serra do Cipó, um importante pólo turístico de Minas Gerais / Eco-epidemiology of leishmaniasis in Jaboticatubas, Serra do Cipo, a major tourist hub of Minas Gerais

A proposta deste estudo foi avaliar a transmissão das leishmanioses no município de Jaboticatubas, Serra do Cipó, região turística de Minas Gerais.Para tal, foram realizados estudos entomológicos e de reservatórios urbanos da doença. Para os estudos entomológicos foram selecionados oito bairros,levando-se em consideração a ocorrência de casos humanos, e colocadas armadilhas luminosas do tipo HP, no peridomicílio de 10 residências, durante três noites consecutivas por mês, entre maio de 2012 a abril de 2013. A fauna flebotomínica estudada foi composta de 3.104 exemplares, sendo bastante diversificada com 17 espécies do gênero Lutzomyia e duas fêmeas do gênero Brumptomyia. Com relação às espécies de importância médica e também numerosas, ressaltamos o encontro de Lu. whitmani (33,80%), Lu. intermedia(14,60%) e Lu. longipalpis (7,96%). A taxa de infecção natural geral dos flebotomíneos por Leishmania foi de 3,40%. Foram analisados 249 “pools” de diferentes espécies de flebotomíneos, dentre estes 32 estavam positivos. Para o estudo da taxa de infecção canina, realizou-se inquérito censitário em cães domiciliados em área urbana do município. Foram coletadas 1.105 amostras de soros que foram testadas por meio do DPP® e as positivas confirmadas as infecções através do Ensaio Imunoenzimático ELISA, obtendo-se a taxa média de prevalência canina de 7,78%...

Dos 86 cães positivos, foi escolhida uma amostra aleatória de 11 deles, que foram necropsiados e com as amostras de biópsia de tecidos obtidas foram realizados “imprints”, cultura de parasitos ePCR. Foi realizado o georreferenciamento na zona urbana de todos os casos caninos e humanos de leishmanioses dos últimos 6 anos, e construído um mapa mostrando a distribuição dos casos. A PCR de aspirado medular apresentou maior positividade (63,60%) em relação à pele (9,00%). Já nos“imprints”, a taxa de positividade da pele foi de 36,36% e de medula 0%.Quanto à cultura de aspirados de medula óssea, a positividade foi de 27,27%.Nossos resultados indicam a urbanização das leishmanioses no município,devido à alta densidade vetorial e infecção por Leishmania, expressiva taxa média de prevalência de infecção canina e recentes registros de casos humanos, Portanto, é importante intensificar as ações de controle a fim de evitar que o problema se agrave no município...

Kazal-type serine proteinase inhibitors in the midgut of Phlebotomus papatasi

Sandflies (Diptera: Psychodidae) are important disease vectors of parasites of the genus Leishmania, as well as bacteria and viruses. Following studies of the midgut transcriptome of Phlebotomus papatasi, the principal vector of Leishmania major, two non-classical Kazal-type serine proteinase inhibitors were identified (PpKzl1 and PpKzl2). Analyses of expression profiles indicated that PpKzl1 and PpKzl2 transcripts are both regulated by blood-feeding in the midgut of P. papatasi and are also expressed in males, larva and pupa. We expressed a recombinant PpKzl2 in a mammalian expression system (CHO-S free style cells) that was applied to in vitro studies to assess serine proteinase inhibition. Recombinant PpKzl2 inhibited α-chymotrypsin to 9.4% residual activity and also inhibited α-thrombin and trypsin to 33.5% and 63.9% residual activity, suggesting that native PpKzl2 is an active serine proteinase inhibitor and likely involved in regulating digestive enzymes in the midgut. Early stages of Leishmania are susceptible to killing by digestive proteinases in the sandfly midgut. Thus, characterising serine proteinase inhibitors may provide new targets and strategies to prevent transmission of Leishmania.

Trypanosoma caninum, estudo com isolados de diferentes regiões brasileiras: abordagem molecular e morfológica / Trypanosoma caninum, study of solids from different Brazilian regions molecular and morphological approach

Trypanosoma caninum constitui uma nova espécie recentemente descrita n a infecção de cães domésticos. Apesar de ainda pouco conhecido e estudado, inúmeros casos da infecção natural por esse agente tem sido registrado em diferentes regiões do Brasil, fato que tem despertado o interesse pelo seu estudo. Est a tese objetivou estudar amostras de T. caninum empregando abordagens moleculares e morfológicas. Foram realizados ensaios da PCR utilizando iniciadores para diferent es regiões do gene nuclear (18S rDNA e 24S alfa rDNA) e do gene mitocondrial (citocromo b e região dos minicírculos) cujos produtos foram sequenciados e analisados por programas específicos. Empregou-se, também, testamos alvos direcionados para região ITS1 rDNA a partir da técnica de RFLP-PCR. Adicionalmente, foram empregadas análises por microscopia óptica e eletrônica...

Das análises moleculares foram obtidos os seguintes resultados: a) foi confirmada a identidad e de T. caninum em isolados obtidos nos estados de São Paulo, Minas Gerais, Mato Grosso, Goiás e Rio de Janeiro; b) foi verificado que o tamanho da região dos minicírculos de kDNA de T. caninum é diferente de outras espécies de tripanosomas e c) Análises filogenéticas revelaram que todos os isolados de T. caninum aqui estudados foram agrupados no mesmo cluster, independentemente da precedência geográfica ou marcador genético utilizado. Análises por microscopia óptica mostraram características mo rfológicas intrigantes, as quais foram confirmadas por microscopia eletrônica de tra nsmissão e varredura, revelando a presença de formas epimastigotas atípicas, sem flagelo livre, nos cultivos axênicos. A identificação de novos isolados e o conhecimento da sua distribuição geográfica de T. caninum são dados importantes para a compreensão desse nov o cenário epidemiológico que está sendo descrito em diferentes regiões do Brasil. Este estudo contribuiu com dados inéditos sobre T. caninum , principalmente relacionados aos aspectos morfológicos e genéticos e, representam um avanço no conhecimento biológico e genético deste novo parasito...

Validação de proteínas recombinantes da leishmania infantum e da saliva do lutzomyia longipalpis como biomarcadores para o sorodiagnóstico e avaliação da exposição às leishmanioses / Validation of recombinant proteins of Leishmania infantum and saliva of Lutzomyia longipalpis as biomarkers for serodiagnosis and assessment of exposure to leishmaniasis

O controle das populações de flebotomíneos, a contenção das epidemias nas fases iniciais e a facilitação do diagnóstico precoce dos indivíduos parasitados são estratégias traçadas pela OMS para a vigilância e controle da leishmaniose. Neste contexto, os testes sorológicos utilizando tanto o sonicado de glândula salivar (SGS) dos flebotomíneos quanto o antígeno solúvel de Leishmania (SLA) são importantes ferramentas para o controle/diagnóstico das Leishmanioses. No entanto, os testes realizados a partir da utilização de antígenos obtidos de frações brutas, apesar de apresentarem alta sensibilidade, alguns destes antígenos apresentam reação cruzada com epítopos compartilhados por outros patógenos/vetores. Além disso, o preparo dos antígenos não tem adequada reprodutibilidade devido a grande dificuldade de obtenção e/ou padronização destes. No presente trabalho, objetivamos identificar biomarcadores para a vigilância e o controle das Leishmanioses, utilizando proteínas recombinantes da saliva dos flebotomíneos como biomarcadores de exposição ao vetor e proteínas recombinantes da Leishmania para obtenção de um diagnóstico sorológico mais preciso para a Leishmaniose Tegumentar humana. Numa primeira etapa, foram realizados testes imunoenzimáticos contra as proteínas recombinante da saliva do vetor L. longipalpis (rLJM11 e rLJM17) para estimar a positividade anti-saliva num pequeno número de soros de crianças de uma área endêmica para Leishmaniose Visceral. Foi observado que os soros que reconhecem o SGS do L. longipalpis também reconhecem em diferentes proporções as proteínas rLJM17 e rLJM11. Ademais, as proteína recombinantes foram capazes de detectar a soroconversão anti-saliva de soros de uma segunda área endêmica para LV, havendo aumento no reconhecimento quando utilizadas as duas proteínas recombinantes de forma combinada. Além disso, a análise das curvas ROC evidenciou o desempenho superior da combinação das proteínas rLJM17 + rLJM11. Estes dados foram confirmados com a avaliação das proteínas frente um grande painel de 1.077 amostras de soro de indivíduos de uma outra área endêmica para LV. Nesta etapa, nossos resultados indicam que as proteínas rLJM11+rLJM17 representam uma ferramenta epidemiológica promissora que pode auxiliar na implementação de medidas de controle contra a Leishmaniose Visceral. Numa segunda etapa, testes imunoenzimáticos foram realizados contra uma série de proteínas recombinantes da Leishmania (HSP70, H2A, H2B, H3, H4 e KMP11) a fim de selecionarmos proteínas antigênicas contra soros de pacientes com Leishmaniose Cutânea (LC) e Leishmaniose Mucosa (LM) e que apresentassem elevada especificidade quando testadas contra soros de indivíduos com outras patologias (doença de Chagas, Lúpus Eritematoso Sistêmico, Hanseníase e Tuberculose). Para avaliar a eficácia das proteínas recombinantes foram utilizadas curvas ROC, possibilitando a seleção de antígenos possivelmente mais eficientes que o SLA no imunodiagnóstico da Leishmaniose. As proteínas recombinantes HSP70 e H2A foram selecionadas por apresentarem elevada sensibilidade, sendo reconhecida por anticorpos dos soros de pacientes com LM e LC respectivamente. Na última etapa dos experimentos, utilizando soros de indivíduos que apresentavam outras patologias, observou-se que a reação cruzada diminui frente aos antígenos recombinantes, especialmente para a rHSP70, quando comparamos à observada para o SLA. Nossos resultados mostram a elevada antigenicidade da rHSP70, sugerindo a possibilidade de utilização desta proteína recombinante para o sorodiagnóstico da Leishmaniose Tegumentar. Neste trabalho foi possível identificar e validar o uso de proteínas recombinantes do parasito e da saliva dos flebotomíneos como biomarcadores para o sorodiagnóstico e avaliação da exposição às leishmanioses.

Triagem dos antígenos recombinantes de leishmania infantum utilizando a técnica demulti-antígenos impressos(mapia) no desenvolvimento de imunodiagnóstico paraleishmaniose visceral canina / Screening of recombinant antigens Leishmaniainfantum using the technique of multi-antigen print (mapia) in developing immunodiagnostic for canine visceral leishmaniasis

As leishmanioses são antropozoonoses causadas por diferentes protozoários do. gênero Leishmania. Estima-se que cerca de 350 milhões de pessoas estejam em. áreas de risco, com uma incidência anual de aproximadamente dois milhões de. novos casos no mundo. O cão é o principal reservatório dos centros urbanos e o flebótomo é o vetor responsável por sua transmissão. No Brasil, de acordo com as recomendações do Ministério da Saúde, cães soropositivos para leishmaniose devem ser sacrificado. O diagnóstico recomendado pelo Ministério da Saúde é feito com o teste rápido DPP-LVC® para triagem e o ELISA para confirmação. Trabalhos demonstram que o DPP-LVC® não é capaz de detectar uma parcela da população de cães, o que pode contribuir para a perpetuação da doença nestas áreas. Doze proteínas recombinantes (Lci1A, Lci2B, Lci3, Lci4, Lci5, Lci6, Lci7, Lci8, Lci10, Lci11, Lci12, Lci13) foram clonadas e sequenciadas em um estudo anterior, porém não foram completamente caracterizadas quanto à antigenicidade. Nossa hipótese é que um conjunto de antígenos selecionados a partir dessas proteínas recombinantes de L. infantum poderá ampliar a identificação de animais infectados em áreas endêmicas. O objetivo deste estudo foi identificar um conjunto de antígenos recombinantes de L. infantum, a partir de 12 antígenos previamente selecionados, quanto ao reconhecimento por soros de cães infectados para futuramente compor um teste imunodiagnóstico para leishmaniose visceral canina. No presente estudo, os 12 antígenos recombinantes previamente selecionados foram produzidos em nosso laboratório e purificados em Bio-Manguinhos. O ensaio de MAPIA (Multi-Antigen Print ImmunoAssay), que consiste em uma plataforma de triagem de antígenos em papel de nitrocelulose, mais próxima do teste rápido DPP-LVC®, foi utilizado para avaliação do reconhecimento dos 12 antígenos recombinantes por soros de cães infectados. Na triagem foram utilizados soros caninos positivos para leishmaniose visceral (n = 39), obtidos em estudo epidemiológico de corte transversal em área endêmica. Para avaliação da reatividade cruzada foram utilizados soros de cães com outras patologias: leishmaniose tegumentar (n = 10), tripanossomíase canina (n = 10), babesiose (n = 10) e erliquiose (n = 11), além de soros de animais negativos (n = 40). Inicialmente, foi definido o melhor protocolo para ser utilizado nos ensaios de MAPIA. Posteriormente, a triagem dos antígenos foi realizada com os soros e, para avaliar, a confiabilidade dos resultados obtidos, os testes foram lidos por dois observadores de maneira independente. A concordância entre as leituras visuais dos dois observadores foi avaliada utilizando o índice Kappa. O teste exato de Fisher foi empregado para avaliar diferenças estatísticas entre o índice de positividade das proteínas avaliadas. As proteínas Lci1A e Lci2B foram reconhecidas por 74% e 69%, respectivamente. As Lci4, Lci5 e Lci12 obtiveram reconhecimento de 33%, 31% e 33%, respectivamente pelos anticorpos presentes nos soros. Baixa reatividade dos soros de cães com babesiose, erliquiose, tripanossomíase canina foi observada com as 12 proteínas recombinantes avaliadas. Soros de cães com leishmaniose tegumentar foram os que apresentaram mais reatividade com as proteínas recombinantes. Analises combinatórias foram realizadas para identificar a partir dos 12 antígenos previamente selecionados, o conjunto destes capaz de identificar o maior número de soros de cães com leishmaniose visceral canina testados...

Leishmaniasis is an antropozoonosis caused by different protozoa of the genus Leishmania. It is estimated that approximately 350 million of people are at risk areas, with annual incidence of approximately two million new cases worldwide. The dog is the main reservoir in urban centers and the sandfly is the vector responsible for transmission. In Brazil, according to the recommendations of the Ministry of Health, seropositive dogs for leishmaniasis should be euthanized. The diagnosis is made by the DPP-LVC® as screening and ELISA as confirmatory. Studies have shown that DPP-LVC® is not able to detect a portion of the dog population, which may contribute to the perpetuation of the disease in these areas. Twelve recombinant proteins (Lci1A, Lci2B, Lci3, Lci4, Lci5, Lci6, Lci7, Lci8, Lci10, Lci11, Lci12, Lci13) were cloned and sequenced in a previous study, but were not fully characterized for antigenicity. Our hypothesis is that a set of selected recombinant antigens of L. infantum may increase the identification of infected animals in endemic areas. The aim of this study was identify a set of recombinant antigens of L. infantum from 12 previously selected for recognition by sera from infected dogs to compose an immunodiagnostic test for canine visceral leishmaniasis. The 12 recombinant antigens were produced in our laboratory and purified in Bio-Manguinhos. MAPIA (Multi-Antigen Print ImmunoAssay), which consists in a screening platform for antigen in nitrocellulose paper, was used to assess the recognition of recombinant antigens for 12 sera of dogs infected. MAPIA is closer to rapid test DPP-CVL® than other screening tests. We used this screening method with sera positive for canine visceral leishmaniasis (n = 39) obtained in a cross-sectional epidemiological study in endemic area. For evaluation of cross-reactivity, sera from dogs with other diseases: cutaneous leishmaniasis (n = 10), canine trypanosomiasis (n = 10) babesiosis (n = 10) and ehrlichiosis (n = 11), and animal sera negative (n = 40) were used. Initially, was decided that the best protocol to be used in the assays. Subsequently, screening of antigens was performed with sera and to evaluate the reliability of the results, the tests were read by two observers independently. The agreement between visual readings of the two observers was assessed using the kappa index...

La Leishmaniasis: un reto para la salud pública que exige concertación de voluntades y esfuerzos / Leishmaniasis: a public health challenge that requires concerted efforts voluntaes and

El departamento de La Paz tiene dentro sus ecoregiones dos zonas de endemia para la leishmanisis, que contribuye muy eficientemente con la carga de enfermedad en un 55 por ciento a nivel país, esta contribución se la realiza a mas de 65 por ciento de extensión territorial de ecoregiones como son el trópico y la amazanía, habitat habitual del vector.